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CY3-SCTSM，花菁染料CY3標(biāo)記SCTSM多肽的合成及純化過程
CY3-SCTSM是將花菁染料Cyanine 3（CY3）共價標(biāo)記于SCTSM多肽上的熒光探針。SCTSM多肽是一種短鏈多肽，通常含有絲氨酸（S）、半胱氨酸（C）、蘇氨酸（T）、絲氨酸（S）和蛋氨酸（M）等氨基酸殘基，具有特定的生物功能和結(jié)構(gòu)特征。通過CY3標(biāo)記，賦予多肽熒光性質(zhì)，方便在細胞及分子水平的追蹤和研究。
合成過程：
多肽制備
SCTSM多肽通過固相肽合成法（SPPS）合成，采用Fmoc保護策略，合成結(jié)束后進行脫保護和解離，獲得純凈多肽。
多肽溶解
將純化后的多肽溶解于適宜緩沖液（如PBS，pH 7.4），濃度一般為1-5 mg/mL，保證多肽穩(wěn)定和反應(yīng)活性。
活化染料準(zhǔn)備
CY3以NHS酯形式溶解于無水溶劑（如DMSO），保持活性酯結(jié)構(gòu)，防止水解。
標(biāo)記反應(yīng)
在緩沖液中，將CY3-NHS酯緩慢加入多肽溶液，控制pH約8.0，促進多肽中賴氨酸或N末端氨基與CY3-NHS酯發(fā)生酰胺鍵形成的共價結(jié)合。反應(yīng)溫和，通常于室溫條件下反應(yīng)2-4小時，避光攪拌。
反應(yīng)終止
反應(yīng)完成后，加入胺類緩沖劑（如甘氨酸）以中和剩余的活性酯，防止過度標(biāo)記。
純化過程：
去除游離染料
通過透析或凝膠過濾色譜去除未結(jié)合的CY3染料及小分子雜質(zhì)。
高效液相色譜（HPLC）
采用反相HPLC對標(biāo)記產(chǎn)物進行純化分離，根據(jù)保留時間區(qū)別標(biāo)記與未標(biāo)記多肽，保證產(chǎn)物純度。
產(chǎn)物鑒定
通過質(zhì)譜（MALDI-TOF或ESI-MS）確認多肽分子量及標(biāo)記成功；結(jié)合紫外-可見吸收和熒光光譜確認熒光性質(zhì)。
產(chǎn)品名稱：CY3-SCTSM
純度：95%+
規(guī)格：mg/g
用途：科研

狀態(tài)：固體/粉末/溶液

推薦產(chǎn)品：
CY3.5標(biāo)記果糖 CY3.5-D-Fructose
CY3.5標(biāo)記海藻酸 CY3.5-Alginate
CY3.5標(biāo)記海藻酸鈉 CY3.5-Sodium alginate

CY3.5標(biāo)記積雪草酸 CY3.5-Asiatic acid

僅用于科研，不能用于人體。小編axc