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ATPPLPR-CY5的制備方法

時間:2025-08-04 16:52:53       瀏覽:14
產(chǎn)品名稱:ATPPLPR-CY5的制備方法
一、ATPPLPR-CY5 的特性
熒光標記功能:
CY5 的強熒光信號允許高靈敏度檢測,適用于活細胞成像、體內(nèi)光學成像及流式細胞術(shù)。
近紅外發(fā)射波長可穿透較深組織(如數(shù)毫米),適用于小動物整體成像或臨床術(shù)中導(dǎo)航。
靶向性(需驗證):
若 ATPPLPR 設(shè)計為靶向特定受體(如腫瘤相關(guān)抗原、血管內(nèi)皮生長因子受體),則 ATPPLPR-CY5 可特異性富集于靶組織,實現(xiàn)精準成像。
需通過體外結(jié)合實驗(如 ELISA、SPR)或體內(nèi)成像驗證其靶向效率。
穩(wěn)定性與生物相容性:
共價連接確保 CY5 在體內(nèi)循環(huán)中不易脫落,減少背景信號。
短肽的低免疫原性降低體內(nèi)應(yīng)用風險,但需評估長期毒性。
二、ATPPLPR-CY5 的制備方法
短肽合成:
固相合成法(SPPS):
使用 Fmoc 或 Boc 保護策略,逐步延伸肽鏈至 ATPPLPR。
若需引入巰基修飾位點,可在序列中加入半胱氨酸(Cys)。
純化與鑒定:
反相高效液相色譜(RP-HPLC)純化,質(zhì)譜(MS)確認分子量。
檢測巰基活性(如使用 Ellman 試劑,若含 Cys)。
CY5 標記:
反應(yīng)條件:
NHS 酯法:將 CY5-NHS 溶于 DMF 或 DMSO,與短肽(溶于 PBS 或碳酸鹽緩沖液,pH 7.5-8.5)混合,室溫反應(yīng) 1-2 小時。
馬來酰亞胺法:若短肽含 Cys,使用 CY5-馬來酰亞胺在 pH 6.5-7.5 下反應(yīng),避免巰基氧化。
純化:
透析或超濾去除未反應(yīng)的 CY5,RP-HPLC 進一步純化標記產(chǎn)物。
通過熒光光譜和 HPLC 確認標記效率(通常 >90%)。
溫馨提示:僅用于科研,不能用于人體實驗!wyh


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